STR分型檢測(cè)一般實(shí)驗(yàn)對(duì)樣本的要求:細(xì)胞數(shù)量≥106個(gè),DNA含量>20ng/μl,體積大于20μl。
從精液中提取DNA:
a) 取精液(不少于3 μL)放入1.5 mL離心管內(nèi),加入200 μL 5% Chelex 100(100-200目);
b) 加入2 μL 10 mg/mL蛋白酶K和7 μL 1 mol/L DTT,輕輕混勻;
c) 56℃保溫30-60 min,高速振蕩5-10 s;
d) 10,000-15,000 r/min離心10-20 s;
e) 沸水煮8 min;
f) 高速振蕩5-10 s;
g) 10,000-15,000 r/min離心3 min;
h) 取上清液用于擴(kuò)增反應(yīng);
i) 2-8℃保存或凍存剩余DNA, 再次使用時(shí)重復(fù)步驟f)-h)。