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DNA親子鑒定-如何從精斑中提取DNA?

    DNA親子鑒定即STR分型檢測一般實驗對樣本的要求:細胞數(shù)量≥106個,DNA含量>20ng/μl,體積大于20μl。對于精斑樣本是怎樣提取DNA的呢?

    a)   適量精斑檢材,剪碎后放到1.5 mL離心管中;

    b)   加入1 mL純水,室溫保溫30 min;

    c)   高速振蕩1 min,用牙簽去除載體;

    d)   10,000-15,000 r/min離心2 min;

    e)   去上清僅留50 μL,用無菌吸頭吹打沉淀;

    f)   加入5% Chelex 100 100-200目)至200 μL,加入2 μL 10mg/mL蛋白酶K7 μL 1 mol/L DTT,輕輕混勻;

    g)   56℃保溫60 min;

    h)   高速振蕩5-10 s,10,000-15,000 r/min離心10-20 s

    i)   沸水煮8 min;

    j)   高速振蕩5-10 s,10,000-15,000 r/min離心3 min;

    k)   取上清液用于擴增反應;

l)   2-8℃保存或凍存剩余DNA,再次使用時重復步驟i)-k)。

聲明:該文觀點僅代表作者本人.
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