DNA親子鑒定即STR分型檢測一般實驗對樣本的要求:細胞數(shù)量≥106個,DNA含量>20ng/μl,體積大于20μl。對于精斑樣本是怎樣提取DNA的呢?
a) 適量精斑檢材,剪碎后放到1.5 mL離心管中;
b) 加入1 mL純水,室溫保溫30 min;
c) 高速振蕩1 min,用牙簽去除載體;
d) 10,000-15,000 r/min離心2 min;
e) 去上清僅留50 μL,用無菌吸頭吹打沉淀;
f) 加入5% Chelex 100 100-200目)至200 μL,加入2 μL 10mg/mL蛋白酶K和7 μL 1 mol/L DTT,輕輕混勻;
g) 56℃保溫60 min;
h) 高速振蕩5-10 s,10,000-15,000 r/min離心10-20 s;
i) 沸水煮8 min;
j) 高速振蕩5-10 s,10,000-15,000 r/min離心3 min;
k) 取上清液用于擴增反應;
l) 2-8℃保存或凍存剩余DNA,再次使用時重復步驟i)-k)。