臺胞陳某在大陸南方某城市投資一家食品加工企業(yè),不幸罹患胃癌住院手術(shù)治療,手術(shù)切除的組織被制備成石蠟包埋組織和H.E染色切片用于檔案保存和醫(yī)療診斷。陳某最終因病情惡化不治死亡,其身后留下的企業(yè)財產(chǎn)依法應(yīng)由子女繼承,但當(dāng)陳某兒子持陳某在臺灣登記注冊的有關(guān)證件辦理相關(guān)繼承財產(chǎn)的法律手續(xù)時,卻發(fā)現(xiàn)陳某在大陸是用不同的名字登記注冊公司的。于是相關(guān)部門對陳某與其兒子父子關(guān)系的真實性產(chǎn)生了疑慮,逐要求陳某兒子提供親子關(guān)系鑒定證明以后方可辦理遺傳繼承。但此時死者已經(jīng)被火葬,唯一可以提供親子鑒定的生物材料就是其在醫(yī)院手術(shù)后留下的石蠟包埋病理組織。
檢驗者首先在顯微鏡下觀察由該石蠟包埋組織塊制備而成的H.E病理染色切片,區(qū)分癌變組織及周圍的正常組織,將其放在二甲苯中脫蠟至蓋玻片脫落,小心將癌變組織和正常組織分別移取至不同的離心管中用標(biāo)準(zhǔn)程序進(jìn)行DNA抽取和分型。因此,正常組織顯示正常的STR分型圖譜,用其數(shù)據(jù)與陳某兒子血樣基因型數(shù)據(jù)進(jìn)行親緣關(guān)系分析,結(jié)果表明,二者之間存在親生血緣關(guān)系,累積親權(quán)指數(shù)為206 438.36。
石蠟包埋組織及正常組織和陳某兒子血樣基因型
基因座 |
石蠟包埋組織 |
正常組織 |
陳某兒子血樣 |
||||
D8S1179 |
11 |
15 |
|
11 |
15 |
11 |
15 |
D21S11 |
30 |
31 |
|
30 |
31 |
30 |
32.2 |
D7S820 |
10 |
11 |
|
10 |
11 |
8 |
10 |
CSF1PO |
12 |
12 |
|
12 |
12 |
12 |
12 |
D3S1358 |
16 |
16 |
|
16 |
16 |
16 |
16 |
D5S818 |
13 |
13 |
|
13 |
13 |
11 |
13 |
D13S317 |
9 |
|
|
9 |
11 |
9 |
10 |
D16S539 |
9 |
11 |
|
9 |
11 |
9 |
13 |
D2S1338 |
17 |
20 |
|
17 |
20 |
17 |
23 |
D19S433 |
13 |
14.2 |
|
13 |
14.2 |
13 |
14 |
vWA |
14 |
17 |
|
14 |
17 |
17 |
17 |
D12S391 |
18 |
19 |
|
18 |
19 |
18 |
22 |
D18S51 |
16 |
20 |
21 |
16 |
21 |
12 |
16 |
D6S1043 |
12 |
19 |
|
12 |
19 |
12 |
13 |
FGA |
18 |
24 |
|
18 |
24 |
18 |
21.2 |
AMEL |
X |
Y |
|
X |
Y |
X |
Y |
癌變組織在基因座D13S317上完全丟失等位基因11;在基因座D21S11、D7S820、D19S433、vWA、D12S391和Amelogein上一個等位基因部分丟失;基因座D18S51增加了額外的等位基因20。
當(dāng)石蠟包埋組織或病理染色切片被用于鑒定材料時,癌變組織的微衛(wèi)星不穩(wěn)定性是親子鑒定或個體識別的最大隱性風(fēng)險,等位基因的丟失或增加容易導(dǎo)致雜合子或純合子的誤讀。在親子鑒定中,若等位基因的變異恰好發(fā)生在親代和子代的傳遞基因上,容易引導(dǎo)得出錯誤的鑒定結(jié)論。以此案為例,若D13S317基因座上發(fā)生的不是等位基因11的完全丟失而是等位基因9的完全丟失,則會得出錯誤的排除結(jié)論。因此,在用石蠟包埋病理組織作為親子家電寧檢驗材料進(jìn)行DNA分型時,如若發(fā)現(xiàn)等位基因擴增不均衡的STR分型圖譜,應(yīng)引起鑒定人員的足夠重視,最好的方法就是經(jīng)過顯微鏡觀察鑒別正常和病變組織,盡量取病變組織邊緣的正常組織進(jìn)行DNA分析,最大可能地避免由于病變組織STR變異導(dǎo)致的錯誤鑒定結(jié)論.