人體組織是提取染色體DNA理想的材料，也是常見的物證檢材。碎尸案對(duì)現(xiàn)場提取的尸塊常需作同一認(rèn)定，強(qiáng)奸致孕案，對(duì)引產(chǎn)胎兒組織作DNA分析認(rèn)定親權(quán)關(guān)系等。常用組織臟器檢材依次有腦、肺、肌肉、皮膚、淋巴結(jié)等。肝脾等臟器中DNA含量較高，但肝脾中各種核酸酶很活躍，因此，DNA極易分解，往往不易得到大分子的DNA，不作為首選臟器材料。組織塊送檢前的保存很重要，為了減少核酸被降解，得到組織檢材后應(yīng)盡快冷凍保存，通常在- 200C左右即可，有條件的可在液氮中速凍，如條件不允許，可將組織放70%乙醇暫保存，注意不能用福爾馬林固定保存的方法。針對(duì)不同條件、環(huán)境下的組織材料，取材方法各有不同。一般情況下，取深部肌肉，特別是筋膜包裹的肌肉效果較好。須保留足夠的組織檢材以備復(fù)檢，一般取50～200殼為宜。腦組織DNA含量較多，新鮮腦組織是提取DNA理想材料。碎尸檢材，原則上什么部位新鮮取什么組織，應(yīng)剖開碎尸部分，盡量提取深部肌肉。人流的胚胎組織，須分離母體與胚胎部分，因比重不同用生理鹽水浸泡，可將兩者分開。絨毛組織的DNA代表胚胎組織的DNA。法醫(yī)物證檢驗(yàn)送檢樣品可能是新鮮組織，也可能是高度腐敗的組織塊，或是保存多年的甲醛固定組織，石蠟包埋組織。組織DNA的提取，原則上與血液等檢材相同，分述如下：

（一）新鮮組織或冷凍組織DNA的提取方法：

方法1

(1)組織DNA的提取需先將組織用滅菌去離子水、乙醇沖洗滅菌。

(2)取10～50克組織切碎后勻漿，加TES 2～4ml、10% SDS 0.2～0.4ml、10mg/ml PK 20～40μl，55℃保溫5～8h，直到完全消化。

(3)然后用酚氯仿萃取DNA，步驟同前。

注意事項(xiàng)：

(1)勻漿，研磨雖然能破碎大塊組織，但同時(shí)也會(huì)因勻漿過程中機(jī)械剪切力使DNA受到損傷。因此應(yīng)盡量溫和操作，縮短勻漿時(shí)間。

(2)這種方法主要用于DNA - RFLP分析的檢驗(yàn)技術(shù)。

方法2

(1)將組織于- 20℃以下冷凍，用手術(shù)刀片刮取l～5mg放人1.5ml離心管中。

(2)加5%Chelex - 100 200μl，10mg/ml的PK 2～3μl，于56℃保溫6～8h，并不時(shí)振蕩，直到組織完全消化。

(3)高速震蕩5～10s，在100 ℃水浴中煮沸8min。

(4)高速震蕩5～10s，15000r/min離心3min，上清液4℃保存?zhèn)溆没? 20℃儲(chǔ)存。

注意事項(xiàng)：

Chdex - 100法提取DNA關(guān)鍵是盡量取檢材新鮮部分，但是量不宜太多。提取過程中56℃孵化，保溫時(shí)間要足夠，振蕩要充分。

方法3

(1)取組織0.1g剪碎放于1.5ml離心管內(nèi)，加0.5ml細(xì)胞裂解液(10mmoI/L Tris-HCl pH8.0，15mmol/L NaCl，10mmol/L EDTA - Na2 pH8.0，0.40/0 SDS)，10μl蛋白酶K(10mg/ml)，56℃消化1h，100℃煮沸10min，漩渦震蕩Imin。

(2) 5000r/min離心1min，取上清液3～5ul作PCR模板。

（二）高度腐敗組織的DNA提?。?/div>

方法1

(1)取腐敗相對(duì)較輕的組織0.5g放于1.5ml離心管內(nèi)，加0.4ml細(xì)胞裂解液（10mmol/LTris-HCl pH8.0，15mmol/L NaCl，10mmol/L EDTA. 2Na pH8.0，0.4% SDS）、20V1蛋白酶K ( lOmg/ml)；

(2) 56℃消化2h，酚-氯仿-異戊醇(25：24:1)抽提3次，氯仿-異戊醇(24：1)抽提1次；

(3)加2倍體積乙醇和1/10體積3mol/L NaAc于- 20℃沉淀過夜，15000r/min離心15min：

(4)去上清，加5% Chelex100μl，旋渦震蕩Imin，100 0C煮沸l(wèi)Omin；

(5) 12000r/min離心Imin，取3～5μl上清作PCR。

方法2

(1)刮取- 20℃以下冷凍的腐敗組織10～20g放于10ml離心管內(nèi)，加8～10ml 0.9%的NaCl，800r/min離心3min；棄上清。

(2)加TES 4.5ml、10% SDS Iml、10mg/ml的PK100μl，56℃保溫2～5h，直到完全消化。

(3)用酚氯仿萃取DNA，步驟同前。