1)在脫蠟后的待檢樣本中加入180μl Buffer ATL，另加20μl蛋白酶K，搖勻置56℃中孵育消化直至組織完全消化，液體呈清亮為止。

2)加200μl AL緩沖液置70℃裂解10min。

3)加200μl乙醇(96％～100％)振蕩混勻。

4)在離心機(jī)上稍作離心后，將全部液體小心轉(zhuǎn)移到硅膜層析柱上，以6000g (8000r/ min)離心2min，棄收集液。

5)將硅膜層析柱移至另一干凈收集管上，小心加入500μl AW1緩沖液，以6000g (8000r/min)離心2min，棄收集液。

6)將硅膜層析柱移至另一干凈收集管上，小心加入500μl AW2緩沖液，以6000g (8000r／min)離心2min，棄收集液。

7)再以20 000g (14 000rlmin)離心3min以使硅膜完全干透。

8)將硅膜層析柱移至一普通離心管(1. 5ml)上，加20～100μl TE緩沖液將結(jié)合在硅膜上的DNA洗脫。甲醛固定組織的洗脫液體積為200yl，2片石蠟包埋組織的洗脫液體積為100μl，H.E染色切片組織的洗脫液體積為50μl。

9)在室溫(15～25℃)條件下靜置約1min，以20 000g (14 000r/min)離心1min，收集DNA洗脫液。

（二）IQ法

采用Promega公司的Tissue and Hair Extraction Kit (for use with DNA IQTM)提取試劑盒，經(jīng)過蛋白酶K消化、磁化樹脂結(jié)合（磁化架）、洗滌純化（lysis buffer，3次）和DNA洗脫(Elution buffer 100μl，65℃）四個步驟可完成DNA提取，操作過程如下所述。

1)在脫蠟后的待檢樣本中加入200μl含有蛋白酶K(1.8mg/ml)和DTT (0. Imol／L)的孵育緩沖液(IB)，搖勻，置于56℃中孵育消化，直至組織完全消化，液體呈清亮為止。

2)加400μl消化緩沖液(lysis buffer)。

3)加14μl樹脂(Resin)，振蕩混勻，置于室溫5min后再振蕩2s立即放置在磁化架上結(jié)合，移除多余液體。

4)再加100μl含有DTT (0.01mol／L)的消化緩沖液(lysis buffer)，振蕩2s立即放置在磁化架上結(jié)合進(jìn)行洗滌純化。重復(fù)3次。

5)在磁化架上將樹脂(Resin)嘹干5min，加20～100ul洗脫緩沖液(EB)振蕩后置65℃5min，然后振蕩2s后立即放置在磁化架上，收集液體DVA。

（三）Chelex-100法

1） 56℃消化(200μl 5%Chelex，40μl 10mg/μl蛋白酶K，8μl 1mol／L DTT) 至溶液清澈。

2）劇烈震蕩5 5～10s。

3）沸水煮8min。

4）劇烈振蕩5～10s； 14000r/min離心5min；取上清液用于擴(kuò)增反應(yīng)。