年齡鑒定是法醫(yī)學(xué)個(gè)體識(shí)別的重要內(nèi)容。通過(guò)生物檢材準(zhǔn)確估計(jì)個(gè)體年齡可以為案件刮偵破提供重要線索。用DNA技術(shù)進(jìn)行年齡鑒定豐富了個(gè)體識(shí)別在年齡推斷方面的內(nèi)容,真有重要的法醫(yī)學(xué)實(shí)用價(jià)值。
近年的研究表明,人類年齡超過(guò)20歲的個(gè)體,其組織細(xì)胞中線粒體DNA存在一段4977bp缺失的現(xiàn)象,與年齡增長(zhǎng)存在一定的相關(guān)性。有研究者以不同年齡(3個(gè)月~ 97歲)的93具解剖尸體的肌肉組織為檢材。提取DNA(核DNA和線粒體DNA)進(jìn)行PCR擴(kuò)增。使用的擴(kuò)增引物為I35/H35,在線粒體基因組中的定位分別為8285/13928。只有當(dāng)特定的4977bpDNA發(fā)生缺失時(shí),這對(duì)引物才能擴(kuò)增出一段667bp的產(chǎn)物DNA。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)獲得擴(kuò)增產(chǎn)物所需的模板DNA量隨被測(cè)者年齡的增大而減少。尤其明顯的是,20歲以下個(gè)體用多達(dá)1000ng的模板DNA也無(wú)法獲得擴(kuò)增產(chǎn)物;而70歲以上的個(gè)體只需Ing模板DNA即可得到擴(kuò)增產(chǎn)物。綜合實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù),發(fā)現(xiàn)此4977bp線粒體DNA缺失水平與年齡的增長(zhǎng)呈正相關(guān)。此研究為進(jìn)一步通過(guò)線粒體DNA缺失確定個(gè)體的年齡提供了一個(gè)好開(kāi)端。
端粒( telomere)是指真核細(xì)胞柒色體末端的DNA序列,其生物學(xué)功能是保持染色體的穩(wěn)定。端粒是富含G寡核苷酸的序列,由12~16個(gè)核苷酸串聯(lián)重復(fù)而成,人類的端粒DNA為5~15kb,主要由TTAGGG片段串聯(lián)重復(fù)構(gòu)成,其重復(fù)次數(shù)為800~3000次。Harley等人通過(guò)培養(yǎng)不同年齡和人體不同部位的成纖維細(xì)胞,觀察端粒DNA長(zhǎng)度的變化。發(fā)現(xiàn)隨著培養(yǎng)細(xì)胞分裂次數(shù)的增多,端粒DNA長(zhǎng)度逐漸縮短,端粒DNA的量也逐漸減少。這種變化與細(xì)胞的靜止和生長(zhǎng)狀態(tài)無(wú)關(guān),只與細(xì)胞的分裂次數(shù)相關(guān)。細(xì)胞平均倍增一次,端粒DNA的長(zhǎng)度大約減少50bp。Vaziri檢測(cè)人類外周血細(xì)胞的端粒DNA長(zhǎng)度時(shí),也發(fā)現(xiàn)了這種規(guī)律,端粒DNA長(zhǎng)度每年丟失41±7.7bp。端粒DNA丟失的速率在人的整個(gè)生長(zhǎng)過(guò)程中是不相同的。青年時(shí)期端粒DNA的丟失較緩慢,隨著年齡的增大,特別是進(jìn)入老年后,端粒DNA長(zhǎng)度由于不完全復(fù)制而逐漸縮短。不同種族、不同性別、不同組織端粒DNA有差異,端粒DNA長(zhǎng)度不完全相同。這些發(fā)現(xiàn)提示,通過(guò)選擇合適人群和組織,檢測(cè)端粒DNA長(zhǎng)度和端粒DNA量的變化,可以發(fā)現(xiàn)端粒DNA變化與年齡的關(guān)系。這種關(guān)系有可能用于法醫(yī)生物學(xué)檢材推斷年齡的研究。