犯罪現(xiàn)場的法庭證據(jù)形式多樣。例如,在性犯罪案的現(xiàn)場可提取到一塊床單。在法醫(yī)實驗室中,這條床單經(jīng)過仔細的檢查后選定某些區(qū)域再進一步檢驗。在從樣本中提取DNA前,應(yīng)先進行預試驗’以確定在某份物證(例如一條褲子)上是否有血液、精液之類的生物體液。在一件臟內(nèi)衣上檢測血痕或精斑僅能試著分析。法醫(yī)關(guān)注的三種基本斑跡來自血液精液和唾液。陰道分泌物、尿液和糞便鑒定對調(diào)查也很重要。 j
血清學是一種被廣泛應(yīng)用的利用抗原和血清抗體反應(yīng)的實驗室檢測方法。例如,混合抗A、抗B血清和一份待檢血樣,根據(jù)凝集反應(yīng)進行AB0血型分型。在現(xiàn)代法醫(yī)生物學領(lǐng)域,血清學仍起著重要作用,但是在一些方面則次于DNA,因為預試驗并不能像DNA分型一樣具備個體識別能力。
1.血痕的檢測
血液是由血漿和紅細胞( erythrocyes)、白細胞(leukocyres)、血小板(thrombocvtes)等固體成分組成。多數(shù)血液的預試驗著重于檢測血紅蛋白分子。血紅蛋白存在于紅細胞中,轉(zhuǎn)運氧氣和二氧化碳。Abacus Diagnostics公司(West Hills,CA)的ABAcardR Hema TraceR 試劑盒可用簡單的免疫層析法對人血進行識別。這項試驗的檢測限為0.07μg/ml的血紅蛋白,對人類、高級靈長類動物及白鼬的血液具有特異性(Johnston et a1.,2003)。
魯米諾( Luminol)是用于血液識別的另一種預試驗,因電視系列劇《CSI:鑒證實錄》 ( Crime Scene Investigation)而廣為人知。o.】g的3一氨基.鄰苯二甲酰肼和5.Og的碳酸鈉混合后加入lOOml的去離子水即制成魯米諾試劑。使用前加入0. 7g的過硼酸鈉(Saferstein, 2001)。向要檢測的物體上噴灑魯米諾,可快速檢測大面積的血痕。噴灑過的樣本必須在 黑暗的環(huán)境中才能看到清晰的熒光。魯米諾還可定位稀釋IOOO萬倍的微量血(Saferstein, 2001)o犯罪現(xiàn)場的證據(jù)檢材用魯米諾檢測后,對DNA檢測沒有抑制作用(Gross et al., 1999)。預試驗并不干擾后續(xù)DNA檢測的實證,對法醫(yī)實驗室決定怎樣處理生物證據(jù)檢材非常重要( Hochmeister et a1.,1991;Budowle eta1.,2000)。
2.精斑的檢測
2/3以上需進行法醫(yī)DNA檢測的案件涉及性犯罪證據(jù)。幾毫升精液中通常含有數(shù)以千萬計的精子。精斑的特異性檢測有:鏡下檢出精子、酸性磷酸酶( AP)或前列腺特異性抗原(PSA或p30)檢測。一些實驗室用顯微鏡觀察精子的存在,作為性犯罪證據(jù)。然而,無精子或少精的男性在其射精時沒有或僅有少數(shù)精子。另外,做過輸精管結(jié)扎手術(shù)的男性不釋出精子。因此,精液特異性酶試驗在性犯罪案件中確認精液的存在時是很有用的。
酸性磷酸酶是前列腺分泌到精液中的一種酶,精液中的含量通常比身體其他體液高出400倍(Sensabaugh ,1979;Saferstein ,2001)。加幾滴0【,萘酚磷酸鈉和固藍B后呈現(xiàn)紫色,或加人4一甲基傘基磷酸鹽后在紫外燈下出現(xiàn)熒光,均可表示存在AP。面積較大的針織物可將衣物或床單壓在同等大小的濕濾紙上轉(zhuǎn)移,再用濾紙進行預試驗。對大部分針織物選擇性
的篩查,為后續(xù)的檢驗確定精斑的位置(Saferstein,2001)。
前列腺特異性抗原發(fā)現(xiàn)于20世紀70年代,其中包含名為p30的蛋白質(zhì)(因其分子量為30 000Da),具有法庭科學價值(Sensabaugh,1978)。p30最初被認為只存在于精液,后來有報道稱也少量存在于乳汁(Yu及Diamandis,1995)和其他體液中。PSA在精液中的濃度為300~4200ng/ml(Shaler,2002)。Seratec (Goettingen,Germany)和Abacus診斷(West Hills,CA)標記PSA/p30試劑盒(類似早孕試驗試劑)可用于法醫(yī)學精斑確證實驗( Hochmeiste,et al.,1999; Simich et al.,1999)。
3.精子的直接觀察
許多法醫(yī)實驗室傾向于將觀察到精子作為精子的確證試驗。最常用的方法是用去離子求潤濕的棉簽提取針織物或人類皮膚上已于的精液。將獲得的細胞涂在顯微鏡載玻片上,加熱固定。固定的細胞用一種“圣誕樹”染料染色,這種染料中包括硫酸鋁、核堅牢紅、善味酸和靛紅(Shaler,2002)o將染色后的載玻片置于顯微鏡下可觀察到精子特異的頭部囊長尾巴。圣誕樹染料可將精子頭部的前端染成紅色或粉紅色,后端染成深紅色,精子的中言墨呈藍色,尾巴被染成黃綠色( Shaler,2002)。弗吉尼亞大學的John Herr芷研究一些用熒光標記精子頭部而特異性抗體標記尾部的“精子素描”方法,以便在女性上皮細胞過多情況下觀察到精子細胞。
4.唾液斑的檢測
針對淀粉酶的預試驗可用于檢測唾液的存在。唾液斑基本上是肉眼看不到的,非常難 觀察。評估法醫(yī)學樣本的酶含量有兩種常見方法:Phadebas試驗和淀粉碘化物輻射狀擴散試驗( Shaler,2002)。通??稍谝Ш?、煙蒂和水瓶上檢到唾液斑(Abaz et a1.,2002;Shale, 2002)。目前正在研究一種利用mRNA圖譜對包括唾液在內(nèi)的各種體液進行檢測的分子生物學方法(Juusola及Ballantvne,2003)。這種分子生物學試驗具有極高的特異性和靈敏性,可同時檢測血液、精液和唾液。