染色質(zhì)中DNA和蛋白度大約各占一半,DNA和蛋白質(zhì)均是大分子物質(zhì)。提取DNA的基本原理是利用DNA和蛋白質(zhì)對提取過程中各種試劑如蛋白酶、有機(jī)溶劑(苯酚、氯仿、乙醇)等不同的反應(yīng)或溶解性來達(dá)到彼此分離的目的。一個(gè)典型的提取程序包括下面四個(gè)步驟:
(1)在弱堿和螯合劑存在的條件下進(jìn)行組織勻漿,溶解細(xì)胞或細(xì)胞核膜。
(2)利用去垢劑和蛋白酶消化蛋白質(zhì),分離DNA。
(3)用有機(jī)溶劑如苯酚、氯仿,除去殘余蛋白質(zhì),萃取DNA。
(4)用乙醇或某些鹽類從溶液中沉淀DNA。
以酚/氯仿抽提為主的有機(jī)溶劑提取法是DNA提取的經(jīng)典方法,用這些方法可獲得100~ l000kb左右的基因組DNA,而且提取的DNA純度高,可用于RflPs以及以PCR為基礎(chǔ)的所有法醫(yī)DNA分析技術(shù)。