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DNA親子鑒定之不同保存條件檢材分型

    DNA主要存在于細(xì)胞核中,含有核細(xì)胞的體液、分泌液及其形成的斑痕和各種器官組織均可作為檢材進(jìn)行DNA分型。常見法醫(yī)物證檢材大多是生物性的斑痕,能否從中提取獲得可供分型的DNA,受保存條件和斑痕載體基質(zhì)性質(zhì)的多重影響。

    Lahiri等(1993)研究了MgCl2EDTA,不同條件保存全血樣品中提取DNA的質(zhì)和量。發(fā)現(xiàn)高濃度鎂離子(10mmol/L)會(huì)促進(jìn)高分子量DNA降解,而EDTA有抑制鎂離子降解DNA的作用。在高濃度EDTADNA能較好保存。保存在室溫和3724h的全血DNA提取量沒有顯著性差異。也觀察到保存在-70℃的高分子量DNA反復(fù)凍融4次后有部分降解趨勢。Pzinz等(1989,1990)研究了各種不同載體基質(zhì)對血痕種提取DNA的質(zhì)和量的影響。為了檢查能從血痕種回收的DNA數(shù)量和質(zhì)量,用200微升血在11種不同載體基質(zhì)做了實(shí)驗(yàn)。結(jié)果表明全部11種不同載體基質(zhì)的血痕保存2天之后都能提取獲得高分子量DNA。從血痕種回收DNA量的多少差異相當(dāng)大,不僅與不同載體基質(zhì)有關(guān),也與相同載體基質(zhì)不同樣品能提取獲得的DNA數(shù)量也明顯減少。相反,表面平滑的載體雜質(zhì),例如紙,玻璃和平滑皮革、玻璃、尼龍、木材、平滑的皮革和羊毛上的血痕有較好的DNA回收率,高達(dá)10微克。藍(lán)色的斜紋粗棉布和墻紙次之,最高6微克。棉布材料和地毯再次之,最高4微克。而翻毛皮革最低,最高2微克。在藍(lán)色的斜紋粗棉布,翻毛皮革和地毯樣品中,某些化學(xué)物質(zhì)抑制限制酶消化DNA,被其污染的DNA不能正確進(jìn)行RFLP分型。

    一般來說,冷凍是保存DNA嘴還的方法,在-70℃或液氮中,DNA可以長期保存。生物性斑痕保存不善,對DNA分型有很大影響。潮濕不僅有利于細(xì)菌或酶菌生長,而且能保持核酸酶的活性,導(dǎo)致DNA降解。所以在不能冷凍保存時(shí),檢材應(yīng)晾干保存。

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