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DNA親子鑒定-從口腔刮拭物樣本中提取DNA

   STR分型檢測(cè)一般實(shí)驗(yàn)對(duì)樣本的要求10萬個(gè)細(xì)胞以上即可,盡管對(duì)于口腔拭子樣本一根棉簽上就可以附著10萬個(gè)口腔黏膜細(xì)胞,但作為DNA親子鑒定樣本, 在方便采集的情況下,盡可能采集5-6根棉簽。根據(jù)我國(guó)2010410日國(guó)家發(fā)布的親權(quán)鑒定技術(shù)規(guī)范SF/Z JD0105001-2010中的規(guī)定口腔拭子提取DNA……

     采用Chelex-100法(見如下步驟)或其它經(jīng)過了驗(yàn)證的方法抽提DNA。若不經(jīng)過DNA抽提而直接將檢材用于PCR,方法必須經(jīng)過驗(yàn)證。

     從口腔刮拭物樣本中提取DNA

    1)   用牙簽刮拭口腔粘膜,將其放入1.5 mL離心管內(nèi),加入200 μL 5% Chelex100-200);攪動(dòng),使細(xì)胞脫落;

    2)   56℃保溫15-30 min

    3)   高速振蕩5-10 s,沸水煮8 min;

    4)   高速振蕩5-10 s,10,000-15,000 r/min離心2-3 min;

    5)   取上清液用于擴(kuò)增反應(yīng);2-8℃保存或凍存剩余DNA。

聲明:該文觀點(diǎn)僅代表作者本人.
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